如何使用Sequencher软件查看DNA序列

Sequencher是DNA序列分析的软件。它可以和自动序列分析仪一同工作,并且因为它可以Contig组装、很短的学习曲线、用户友好的编辑工具,以及技术而被周知。

 

使用Sequencher软件查看DNA序列

使用Sequencher的方法步骤:

A、查看峰图或编辑

  1. 打开软件

  2. 载入文件(abl格式)

  3. 双击打开文件,可见序列信息

  4. 点击右上角的“show chromatogram”可见峰图

 

B、整合多个文件,存为文件:

  1. 打开文件

  2. 载入文件夹import

  3. 选中文件,点击file下的export导出,选择“selection as subproject”,弹出保存的对话框,命名保存文件并选择格式(txt)。

该txt文件可用clustal x打开,进行序列比对,保存为aln格式后,可以不用bioedit打开进行编辑修改。

注:Sequencher软件的主要功能为序列查看。序列比对可用MEGA操作,编辑更方便,比对时间稍短。

 

Poly结构后双峰问题:

Poly A/T结构通常致其后的峰图出现重叠峰,PolyG/C结构通常致其后的峰图出现信号衰减。Poly结构是测序失败常见的原因之一,目前还没有很的方法解决Poly结构的影响,但而言,PCR样品Poly结构后双峰的概率很高,而菌液中Poly结构对测序结果的影响较少或没有。

 

解决办法:

  • 反向测序再拼接

  • 连接到载体后测序

也有一些Poly结构对测序影响较低。

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2020-02-27 06:07
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